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Southern Blot杂交实验案例

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实验案例:Southern Blot印记杂交检测-DIG探针标记 技术支持

  钟鼎生物自建立Southern Blot杂交服务平台以来,帮助客户完成过拟南芥、大豆、烟草、苎麻、 玉米、棉花、水稻、油菜等多物种检测,成功发表高水平论文,钟鼎生物的探针使用DIG(地高辛)标记,具有低噪、高敏、无放射性污染等优点,实验过程中保留原始数据和实验材料,数据真实可信,具有可重复性。我们使用传统的胶片曝光与最先进的自动化学发光成像检测系统相结合,确保捕获最佳信噪比的成像时间点,可以交付给客户?#20998;?#26368;好的实验结果,客户可直接使用钟鼎生物提供的southern blot实验数据和图片向高水平的杂志投稿。

  Southern Blot实验的步骤较多,每个步骤都会对结果产生影响,为了准确、快速的完成实验,我们需要客户按照要求提供实验材料信息。我们的实验体系会设置阳性对照,以确保整个实验的方案正确、操作无误。

southern blot杂交服务(基于DIG地高辛标记探针)实验案例

基因组DNA提取实验实例
  基因组提取实验

我们提取基因组DNA,?#20998;?#38656;达到以下标?#36857;?/p>

纯度:OD260/OD280=1.8-2.0
浓?#21462;?0ng/ul
质量≥10ug

推荐使用进口试剂盒或钟鼎生物的高?#20998;?#22522;因组DNA提取试剂盒


 
 
  基因组DNA片?#20301;?/td>    
  基因组DNA片?#20301;?southern

使用常用的限制性内切酶酶切,获得片?#20301;?#30340;基因组DNA,如果客户需使用特殊的内切酶,需协商

 
 
 
  PCR制备地高辛标记探针    
  PCR制备地高辛标记探针

泳道M:1Kb DNA Ladder;

泳道1:dUTP标记的DNA探针;

泳道2:对照的DNA片段

DIG标记的探针,电泳迁移率会增大,其表观分子量会大于未标记的PCR产物

 

 
 
 
  Southern Blot杂交检测(地高辛)    
 

为了保证southern blot实验结果的准确?#26434;?#32654;观性:

1、我们使用传统的胶片曝光与最先进的自动化学发光成像检测系统相结合,确保捕获最佳信噪比的成像时间点,可以交付给客户?#20998;?#26368;好的实验结果。

2、除去Marker和阳性对照,我们建议样品数量不要超过8个,样品太多会导致边?#24403;?#24418;。

3、曝光时间太短,弱带无法显示,曝光时间太长,背景会很高,因此我们会调整曝光时间,?#30452;?#25552;供1小时、2小时、过夜等不同时间的曝光片,确认实验的结果的准确性。

4、southern blot的灵敏度是有限的,丰度太低的片段无法被检测出来,我们以内参作为实验依据,同时也作为收费依据。

 
 
 
 

1、上述实验图片为钟鼎生物精选的比较好的实验结果,为原始曝光胶片扫描,部分结果已见稿。
2、由于样品不同,即使是同一物种的实验材料,我们不?#20449;?#25152;有客户的订单都可以达到上述图片效果。
3、拒绝PS,钟鼎生物可提供曝光的原始胶片,确保实验结果真实可靠,可寻求有实力的第三方实验室验证。

 
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